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本试剂盒采用比色法测定样本中的黄嘌呤氧化酶含量，测定原理如下：黄嘌呤氧化酶催化次黄嘌呤氧化生成黄嘌呤，同时产生超氧阴离子自由基。当存在电子受体及显色剂时，生成紫红色结合物，通过测定紫红色结合物的生成量来计算XOD的活力。

该方法的优点包括快速简便，重复性强，适用于动物血液、组织、各种体液、细胞等的黄嘌呤氧化酶(XOD)测定。

产品信息

组分信息

备注：

建议60427ES-A试剂一和60427ES-D试剂四放于-25～-15℃保存。

试剂一需室温或37℃预温后使用。

试剂四的溶解：临用前取试剂四稀释液1支，稀释试剂四粉剂1支，稀释好溶液-25～-15℃保存，尽量避免反复冻溶。

试剂四粉剂量较少，可能会附着于管壁或盖子内，可4000转/分，离心2分钟后再用稀释液溶解。

使用说明

1.仪器试剂准备

含530 nm波长的分光光度计、1 cm光径比色皿、37℃恒温水浴或气浴箱、台式低速离心机、各种规格移液器、双蒸水、生理压水（0.9%）或 PBS（0.1 M）、涡旋混匀器、一次性塑料试管（或离心管）、蛋白测定试剂。

2.样本前处理

1）血清/浆

血清可直接取样进行检测；血浆需以3000～3500转/分，离心10分钟，小心吸取澄清的上清进行检测，弃去上层脂肪与下层沉淀，若仍有混浊可反复离心。

2）红细胞

抗凝全血以1000转/分，离心10分钟，弃上层血清，取下层红细胞按1︰49的比例加双蒸水制成溶血液待测。配好的溶血液最好当天做检测，2～8℃存放时间不超过8小时。

3）组织

准确称取组织重量，按重量(g):体积(mL)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.86%或0.9%的生理盐水)，冰水浴条件下，机械匀浆，制备成10%的匀浆液，2500～3000转/分钟，离心10分钟，取上清液进行测定。

3.操作表

参考取样量（a*）： 血清50～100 μL；1︰49溶血液50 μL；10%肝组织匀浆20～100 μL。

4.计算公式

1）血清/浆XOD活力计算：

定义：每升血清/浆在37℃每分钟转化1 μmol的底物所需的酶量为一个酶活力单位。

计算公式：血清XOD活力（U/L）= (A测定-A空白) ÷ ε × (V反总÷V样) × [1 ÷ (T × d)]

2）溶血液XOD活力计算：

定义：每克血红蛋白在37℃每分钟转化1 μmol的底物所需的酶量为一个酶活力单位。

计算公式：溶血液XOD活力（U/gHb）= (A测定-A空白) ÷ ε × (V反总÷V样) × [1 ÷ (T × d)] ÷ CHb

3）组织XOD活力计算：

定义：每克组织蛋白在37℃每分钟转化1 μmol的底物所需的酶量为一个酶活力单位。

计算公式：组织中XOD活力（U/gprot）= (A测定-A空白) ÷ ε × (V反总÷V样) × [1 ÷ (T × d)] ÷ Cpr

其中，ε：表示呈色物消光摩尔系数，12.6×10-3；V反总：表示反应液总体积，(2.27+a) mL；V样：表示取样量，mL；

T：表示反应时间，20 分钟；d：表示为比色光径，1 cm；CHb：表示血红蛋白含量，gHb/L；Cpr：表示匀浆蛋白含量，gprot/L。

2～8℃保存，有效期3个月。