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Enterokinase, Recombinant, Expressed in E. coli 大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)
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产品介绍

重组牛肠激酶(rb-EK)是一种高纯度的重组牛肠激酶轻链片段,其氨基酸序列与牛源肠激酶轻链一致,有着和天然提取的肠激酶同样特异的酶切位点,切割位点是Asp-Asp-Asp-Asp-Lys(DDDDK),可用于去除位于蛋白N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签,保障重组融合蛋白准确的N端序列,同时重组牛肠激酶具有比天然酶更高的切割活性。

3522集团新网站大肠杆菌表达重组牛肠激酶(不带标签)为采用大肠杆菌表达的高纯度、高活性、高特异的牛肠激酶,不含其他蛋白酶,可以在较宽pH范围(4.5-9.5)和较宽温度范围内有效切割融合蛋白且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。本品不含标签,由于具有极高酶切活性,酶切反应使用量少,不影响下游蛋白应用,可不考虑除去。

另外我司还提供酵母表达重组牛肠激酶(His标签)(Cat#20395ES), 客户可根据来源(大肠杆菌或酵母表达)、标签(是否带His标签)等选择适合您的重组牛肠激酶。

产品特色
来源(Source)大肠杆菌表达
分子量(Molecular Weight)理论值25.85 kDa
外观(Appearance)澄清、无色至淡黄色液体
酶浓度(Enzyme Concentration)≥5 U/uL
活性定义*(Activity Definition)一个活性单位定义为25°C,12-16 h,在25 mM Tris-HCl,Ph 8.0缓冲体系下,将50 μg带有肠激酶酶切位点的融合蛋白(3522集团新网站肠激酶酶切阳性底物,分子量约64.6 KDa,Cat#20391ES)切开95%所需要的酶量。
内毒素检测(Endotoxin)用LAL法测定内毒素含量小于1 EU/μg
质量保证(Quality assurance)经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;不含其他蛋白酶,无非特异性切割
缓冲体系(Buffer)50 mM Tris-HCl,pH8.0,250 mM NaCl,2 mM Ca 2+,50% Glycerol

活性定义:*不同底物,酶切效率可能不同;一般蛋白越小,切割效率越高,3522集团新网站酶活定义为采用分子量约64.6 KDa的大蛋白,对于寡肽底物一般最大可达到1U切500 ug。

存储条件

-25~-15℃保存,有效期2年。尽量避免反复冻融(5次以内,无活性损失)

FAQ

Q:该酶使用浓度是多少?

A:该酶效力高且待切蛋白结构性质不同,建议先进行预实验摸索酶使用浓度及酶切反应时间。

Q:如果需要去除重组肠激酶,该如何去除?

A:本品不含标签,后续如需去除重组肠激酶,可用阴离子交换树脂(eg.DEAE-FF) 对其进行洗脱。

Q:本品一定要去除吗?

A:本品是具有高酶活力重组肠激酶,切割蛋白使用量少,可不考虑除去。

Q:本品酶切效果不好怎么办?

A:蛋白酶切效果不好,可适当增加酶量,或适当延长酶切时间。

COA
已发表文献

[1] Deng Z, Zeng Q, Tang J, et al. Anti-inflammatory effects of FS48, the first potassium channel inhibitor from the salivary glands of the flea Xenopsylla cheopis. J Biol Chem. 2021;296:100670. doi:10.1016/j.jbc.2021.100670(IF:5.157)

[2] Hong B, Chang Q, Zhai Y, Ren B, Zhang F. Functional Characterization of Odorant Binding Protein PyasOBP2 From the Jujube Bud Weevil, Pachyrhinus yasumatsui (Coleoptera: Curculionidae). Front Physiol. 2022;13:900752. Published 2022 Apr 27. doi:10.3389/fphys.2022.900752(IF:4.566)

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