天然蛋白G(Protein G)是一种分离自G型或C型链球菌属的细胞表面蛋白,与发现于金黄色葡萄球菌的细胞壁表面的蛋白A类似,主要通过与免疫球蛋白(Ig)的Fc区相互作用,结合大多数哺乳动物的IgG,可用于多种抗体(单抗和多抗)的分离纯化。在与不用的免疫球蛋白亚类的结合特性上,ProteinA 和Protein G结合性能不太一样,相比ProteinA, ProteinG 对牛、羊、马等多克隆抗体有更强的结合力,它还可以结合不能与ProteinA很好结合的大鼠lgG、人lgG3和小鼠lgG1(详见附录1)。
本品使用的是基因改造后的蛋白G,不仅维持其本身的Ig亲和特性,同时也去除了天然蛋白本身的非主要结合域以降低非特异性结合,rProtein G Agarose Resin 4FF以高度交联的琼脂糖凝胶为基质,重组Protein G为配基,具有很高的物理化学稳定性,可以在相对较高的流速下进行抗体的纯化,适用于工业客户。利用本品经过一步亲和层析,即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体,使用方便,应用广泛。
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基质(Matrix) |
高度交联的4%琼脂糖微球 |
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配体(Ligand) |
重组蛋白G |
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孔径(Bead size) |
45-165 µm |
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最大流速(Flowmax) |
0.3 MPa,3 bar |
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储存缓冲液(Buffer) |
含20%乙醇的1×PBS |
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载量(Capacity) |
>30 mg human IgG/ mL 基质 |
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pH范围(pH range) |
3-10 |
冰袋运输。2-8℃保存,2年有效。
需准备试剂
【注】建议以下缓冲液在使用前用0.22 μm或0.45 μm滤膜过滤。
结合/洗杂缓冲液:0.15 M NaCl, 20mM Na2HPO4, pH7.0
洗脱缓冲液:0.1 M甘氨酸,pH 3.0
中和液:1 M Tris-HCl,pH 8.5
[1] Zhang C, Wang Y, Zhu Y, et al. Development and structural basis of a two-MAb cocktail for treating SARS-CoV-2 infections. Nat Commun. 2021;12(1):264. Published 2021 Jan 11. doi:10.1038/s41467-020-20465-w(IF:14.919)
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