3522集团新网站

分子生物学
IVD分子诊断
细胞培养与分析
蛋白研究
细胞因子
重组蛋白
抗体
高通量测序建库
病原检测UCF系列
生物医药
工具酶
抑制剂激活剂与常用试剂
仪器
耗材
Alkaline Phosphatase Activity Detection Kit 碱性磷酸酶活性检测试剂盒
分享
收藏
产品详情
FAQ
产品文档
已发表文献
推荐应用
产品介绍

碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,简写为ALP或AKP),又称碱性磷酸酯酶,是一组同工酶,目前已发现六种ALP1-ALP6。广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织,是经肝脏向胆外排出的一种酶。碱性条件下可催化磷酸酯键的水解,从而将底物分子上的磷酸基团去除,转化为羟基。此类底物包括核酸(DNA、RNA)、蛋白、生物碱等。常见的有肠道碱性磷酸酶、非组织特异性碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶等;生物学中碱性磷酸酶(ALP)水平的变化及其活性的高低常被作为一种检测组织行为的指标,如:1)作为iPS成功诱导的标志;ALP在大多数细胞类型中均有表达,但是在iPS细胞内的表达水平明显升高;2)结肠癌细胞分化程度定性和定量的指标;3)血清中碱性磷酸酯酶的升高可导致高碱性磷酸酶血症,常被认为和恶性胆管阻塞,原发性硬化胆管炎,肝癌,肝硬化等肝胆疾病密切相关;4)血清中碱性磷酸酶活性升高还和骨骼损伤导致的骨生成,以及骨骼疾病如纤维骨炎、佝偻病、成骨不全等密切相关;5)碱性磷酸酶水平也会出现一些病理性降低的情况,多见于重症慢性肾炎、儿童甲状腺机能不全、贫血等。对于正常成人来说,血清内ALP的范围为40-150U/L。

对硝基苯磷酸(p-nitrophenyl phosphate, pNPP)是一种常用的磷酸酶显色底物,碱性条件下,可在ALP作用下生成对硝基苯酚(p-nitrophenol, pNP),后者在碱性环境下呈黄色产物,并在405nm处可检测到最大吸收峰。产物黄色越深,说明ALP活性越高,反之则活性越低。因此,通过检测OD405吸光值即可计算ALP活性水平。
产品组分

组分编号组分名称产品规格(100T)储存方法
21101-AALP反应缓冲液 ALP Assay Buffer15ml-20℃
21101-B显色底物 pNPP Substrate2管-20℃避光
21101-CpNP标准品溶液p-nitrophenol Standard100ul (10mM)-20℃避光
21101-D反应终止液 Stop Solution12ml-20℃


产品特色

本品为碱性磷酸酶活性检测试剂盒,可快速、便捷地检测细胞或组织裂解液/匀浆液、血清、血浆、尿液、纯化酶等样品中的ALP活性。该试剂盒包括标准品和空白对照,可进行达100个样品的检测。

存储条件

冰袋运输。-20℃保存,一年有效。其中显色底物、pNP标准溶液需要避光保存。

FAQ

Q:为什么该试剂盒检测不准?

A:可能是试剂盒各个成分没有恢复到室温即使用。

Q:在结果检测时 405nm 处测不到吸光值,怎么办?

A:如果不能测定 405nm,也可以在 400-415nm 范围内检测吸光度。如果不能立即测定,可以在数小时内完成测定,所显现的黄色在数小时(≤ 6h)内稳定。

Q:37℃孵育 5min,为什么检测不出来酶活?

A:建议延长孵育时间至 30min。

Q:该试剂盒中的产品可以直接在室温下操作的吗?

A:ALP 反应缓冲液和 p-nitrophenol 标准品溶液对人体有害,请注意适当防护。反应终止液有腐蚀性,请小心操作。最好在通风橱里操作。

Q:该试剂盒按说明书检测完后如何计算酶活?

A:首先,绘制标曲:0.5mM*标准品的用量分别为4、8、16、24、32和40微升,用微摩尔数做横坐标,标曲方程可通过Excel做;然后,根据标准曲线及待检测样品的吸光度值,可以计算得到样品中p-nitrophenol生成量。再根据酶活性定义进行计算。即p-nitrophenol的微摩尔数除以孵育时间(min)。计算出的酶活单位用U表示。最后,样品的酶活浓度可以用酶活/(上样体积*蛋白浓度),最后可以表示成U/mg。

COA
已发表文献
联系我们
购物车
客服
转染试用