人 T 细胞激活试剂盒是模拟体内抗原呈递细胞（APC）提供的 “双信号”，实现人源初始/静息T细胞高效激活、稳定扩增与功能维持的标准化试剂套装，直接用于PBMC或纯化CD3+T 细胞，广泛适配基础免疫研究与 CAR-T 等细胞治疗研发。
激活原理（双信号模拟）
第一信号（抗原识别信号）：抗人 CD3 抗体结合 T 细胞表面 CD3/TCR 复合物，启动 T 细胞激活的核心信号，替代抗原 - MHC 复合物刺激。
第二信号（共刺激信号）：抗人 CD28 抗体结合 T 细胞表面 CD28，提供必需共刺激信号，避免 T 细胞失能（anergy），显著提升增殖与存活能力。
生长信号（扩增维持）：重组人 IL-2促进激活后 T 细胞的克隆扩增、维持活性与功能（如 CD8⁺杀伤、CD4⁺辅助）。
产品包含
| 组分编号 | 产品名称 | 数量 | 92674ES10 | 92673ES70 |
| 92674ES-A | Recombinant Human IL-2 Protein | 1 | 10μg | 10μg |
| 92674ES-B | Recombinant Anti-Human CD3 mAb | 1 | 50μg | 1mg |
| 92674ES-C | Recombinant Anti-Human CD28 mAb | 1 | 50μg | 1mg |
产品信息
| 产品名称 | 参考使用浓度 | 表达系统 | 外观 | 内毒素 |
| Recombinant Human IL-2 Protein | 10 ng/mL | E.coli | 冻干粉 | ≤10 EU/mg |
| Recombinant Anti-Human CD3 mAb | 1-3 µg/mL | CHO Cells | 液体 | ≤1 EU/mg |
| Recombinant Anti-Human CD28 mAb | 3-5 µg/mL | CHO Cells | 液体 | ≤1 EU/mg |
储存条件
-25 ~ -15℃保存，收到货之后有效期1年。避免反复冻融，打开小瓶前先离心。建议等分分装为一次实验使用量，避免反复冻融
Human IL-2复溶方法
开盖之前，先离心，以将内容物带到底部。使用无菌蒸馏水或PBS复溶，重新配制至0.1-1.0 mg/mL的浓度，可根据后续实验更进一步稀释；长期储存，建议稀释缓冲液中加入载体蛋白(0.1% BSA)；分装为一次实验用量，-80℃冻存，避免反复冻融。
抗人CD3单克隆抗体固定方法（适合： 需要T细胞大量、长期扩增并保持功能的应用 ）
完全培养基配方供参考
| 组分 | 终浓度 |
| RPMI-1640 | 90% |
| 胎牛血清 | 10% |
| 丙酮酸钠100x | 1x |
| L-谷氨酰胺100x | 1x |
| HEPES | 1x |
| 青霉素-链霉素 | 1x |
| β-巯基乙醇 | 55μM |
第一步：抗体包被（实验前一天进行）
1. 将抗人CD3单克隆抗体稀释至PBS中，最终浓度为3µg/mL。
2. 将稀释后的抗人CD3单克隆抗体按每孔1mL加入24孔板中固定。
3. 在37°C、5% CO₂条件下孵育2小时，或在4°C下孵育过夜。
4.从4℃取出包被好的培养板，弃去孔内的抗体溶液。
5.用无菌PBS轻轻洗涤每个孔2-3次，以去除未结合的抗体。
第二步：细胞制备
1. 准备人外周血单个核细胞（PBMC）的单细胞悬液。对于T细胞激活，细胞应重悬于完全培养基中，浓度为(1-3)×10⁶细胞/mL。对于24孔板，推荐浓度为1×10⁶细胞/mL。
第三步：刺激培养
1. 在V型管中准备完全补充的T细胞培养基，向第二步中的细胞悬液中加入以下细胞因子和抗体：
- 5µg/mL抗人CD28单克隆抗体
- 10ng/mL 重组人IL-2蛋白
2. 将所需量的细胞转移到合适的细胞培养板中，最终密度为(1-1.5)×10⁶细胞/mL/cm²。
3. 在37°C、5% CO₂条件下孵育2天。
第四步：细胞计数
1. 培养2天后，检查细胞的健康状况并记录图像。
2. 以400×g离心细胞悬液5分钟，弃去上清液。用PBS洗涤细胞沉淀。
3.. 以400×g离心细胞悬液5分钟，弃去上清液。将细胞重悬于0.5mL 1%牛血清白蛋白（BSA）中，计数细胞。检测细胞活性，要求活性>95%。
第五步：流式分析
激活标志物：CD69和CD25
-25 ~ -15℃保存，收到货之后有效期1年。避免反复冻融，打开小瓶前先离心。建议等分分装为一次实验使用量，避免反复冻融
